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      快速高效琼脂糖凝胶DNA

GalaxyBio Code包装规格价格说明书购物车
FG11050580元
FG1202001950元

快速高效琼脂糖凝胶DNA

快速高效琼脂糖凝胶DNA
小量回收试剂盒
         (离心柱型
 
试剂盒内容
50 货号cat:FG110
200次货号cat:FG120
过滤柱    Filter    Column
50
200
收集管   Collection Tube(2ml)  
50
200
吸附柱        Spin Column
50
200
收集管   Collection Tube(2ml)  
50
200
溶液PB     Buffer PB  
35 ml
140 ml
漂洗缓冲液    Wash Buffer
15 ml
30 ml×2
洗脱缓冲液    Elution Buffer
15 ml
15 ml×2
说明书     Specification
1
1
 
贮存条件:
室温,有效期一年。
 
 
产品简介     
※  GalaxyBio公司与由美国公司通力合作,由美方公司提供全方面技术、关键纯化材料,将核酸纯化等系列产品,在国内推广,实现了进口产品本土化生产。每种产品通过严格的技术把关,已达到进口产品的品质,而价格上却是国产试剂盒的价位。
※  无需溶胶,直接过柱粉碎。目的DNA带从凝胶上切下来后,通过离心粉碎,一次溶出,再采用硅胶膜吸附柱吸附,DNA便可用去离子水(或低盐缓冲液)洗脱出。能从各个等级的琼脂糖凝胶中回收到200bp-40kp的DNA带,且回收率达90%,小于200bp片段请用本公司的同类产品小片段回收。
※  最大吸附量为60ug,实验结果可重复性好。
  ※  纯度好, 直接可以用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
 
操作步骤:
1. 试验前准备及注意事项
 ■请尽量采用浓度<1.5%的琼脂糖凝胶,浓度越小回收效果越好。
■Wash Buffer 使用前请按标签加入无水乙醇并标示。
2. 切胶  将琼脂糖凝胶电泳后的单一目的片段切出(尽量切除多余部分),稍切碎,转入过滤离心管中。
3. 破碎 大于12,000转/分 全速离心5min。速度越大,效果越好。DNA同缓冲液一起溶出到收集管中。
注意:此时可以直接-20℃冻存,也可以进一步过柱纯化,或乙醇沉淀纯化。
4. 吸附 往上述收集管中加入1~5体积的溶液PB (Buffer PB) ,全部转入吸附柱中, 12,000转/分 离心30秒,弃去离心管中液体。
注意:对于几百bp小片段,增大溶液PB (Buffer PB)体积,可以更好回收。
 
5.  漂洗  将700μl的Wash Buffer加入吸附柱Spin Column中,12000rpm离心30-60秒,弃滤液。
6.  再漂洗  将500μl的Wash Buffer加入Spin Column中,12000rpm离心30-60秒,弃滤液。 空柱12000rpm再离心2分钟,除去残留乙醇。
7.  洗脱  将Spin Column按置于新的洁净的1.5ml的离心管上,在吸附柱Spin Column膜的中央处加入50-100μl的水或洗脱缓冲液Elution Buffer,室温静置1分钟,12000rpm离心1分钟洗脱DNA,可立即用于下游分子生物学实验或-20℃保存。
    注意:Elution Buffer 组成为1 mM EDTA和2.5mM Tris-HCI (pH8.5),不影响测序和酶切反应。把水或洗脱液加热于60℃使用时有利于提高洗脱液效率,如果提取的质粒>10kb,请将洗脱液预热至65℃,并适当延长洗脱时间。
注意事项:
1. 请尽量采用浓度<1.5%的琼脂糖凝胶,浓度越小回收效果越好。
2. 琼脂糖凝胶要求新配制、刚刚跑过电泳的。电泳缓冲液,也要求新配制的。
3. 如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
4. 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
5. 溶液PB为刺激性液体,皮肤等接触后请用大量水冲洗,或直接就医
 
 
 
 
 
 
 
 
DNA浓度和纯度检测
   OD260值为1,相当于50ug/ml的双链DNA。也可以通过DNA Marker通过琼脂糖凝胶电泳半定量。
   OD260/ OD280比值一般为1.7-1.8,如果洗脱时不使用缓冲液,而使用去离子水,由于受PH值和离子浓度的影响,比值会偏低。
 
 
 
 
 

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