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      EZ-RNA-B3  骨髓细胞总RNA小量快提试剂盒

GalaxyBio Code包装规格价格说明书购物车
RN32550680元
RN3262502800元

EZ-RNA-B3  骨髓细胞总RNA小量快提试剂盒

EZ-RNA-B3
骨髓细胞总RNA小量提试剂盒
试剂盒内容
50
Cat:RN325
250
Cat: RN326
Miniprep column
50
50×5
2 ml microfuge tube
50
50×5
溶液RS  Solution RS
25 ml
25ml×5
溶液RR Buffer RR
25 ml
25 ml×5
溶液RW1 Buffer RW1
20 ml
20 ml×5
溶液RPE  Buffer RPE
15 ml
15 ml×5
RNase-free Water
10 ml
10 ml×3
说明书     Protocol
1
1
 
贮存条件:
室温,有效期2年。
 
产品简介:     
※  GalaxyBio 公司与美国公司通力合作,由美方提供全方面技术、关键纯化材料,将核酸纯化等系列产品,在国内推广,实现了进口产品本土化生产。每种产品通过严格的技术把关,已达到进口产品的品质,而价格上却是国产试剂盒的价位
※  由于骨髓的特殊成分,使得骨髓细胞的DNA和RNA提取比较困难,本产品采用独特的细胞裂解沉淀技术,快速、方便,高得率、高纯度。20分钟可从200μl-400μl的骨髓细胞中快速提取高质量的RNA。
  ※  提取的RNA分子完整、纯度高,适用于Northern Blot 、RT-PCR、体外翻译、Primer Extension、RNase保护测定、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。
注意事项:
1. 所有试剂用DEPC处理过的溶剂配制。请选用RNase-free枪头和离心管,以避免提取过程中RNA被RNase降解。
2. 试剂含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水和生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
3.试验中需要异丙醇和乙醇,请提前准备RNase-free的异丙醇和乙醇。
操作步骤:
1.试验前准备及注意事项
试剂盒在第一次使用前请按试剂瓶标签说明在溶液RW1 溶液RPE中加入无水乙醇,并做好标记;溶液使用后,避免长期暴露于空气中,用后请及时盖紧盖子,密闭保存。
2.约200μl 骨髓细胞加入400μl Buffer RS 在离心管中混匀。温和充分震荡几次。
*Buffer RS 占的比例越大,RNA稳定。大于4倍时,可以4保存12
 
.一般情况可以-20-80长期保存。
3.加入400ul溶液RR,颠倒混匀。
* 禁止使用蜗旋器,防止基因组断裂混入。4℃条件下离心。
4. 大于12000×g 离心10 min。
* 4℃条件下离心
5. 取上清至1.5 ml离心管中,加入0.6体积的异丙醇(或加入1体积无水乙醇),混合均匀。此步提取几百个碱基的小片段RNA是必须的
 
步骤6-10可选择硅胶膜离心柱吸附法(较为纯净)直接离心沉淀法(相对前者提取量较多)
A. 硅胶膜离心柱吸附法(较为纯净)
6A. 将制备管置于2 ml (试剂盒内提供) 离心管中,转移步骤5中的混合液到制备管中,6,000×g离心1min(如果液体较多可以分两次转移和离心)。
* 4℃条件下离心。
7A. 弃滤液,将制备管弃滤液,将制备管置回到2 ml离心管中,制备管中加入700 μl Buffer RW1,12,000×g离心1 min。
* 确认在BufferRW1 中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇
8A. 弃滤液,将制备管置回到2 ml离心管中,在制备管中加入700 μl Buffer RPE,12,000×g离心1 min;以同样的方法再用700 μl Buffer RPE洗涤一次。
* 确认在BufferRPE中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
9A. 弃滤液,将制备管置回到2 ml离心管中,12,000×g离心1 min。
10A. 将制备管放入干净RNase-free的1.5 ml离心管中,在制备管膜中央加30-100 μl RNase-free Water(加入液体越少,浓度越大) 。室温静置1 min,12,000×g离心1 min,洗脱得RNA
 
B. 直接离心沉淀法(相对前者提取量较多)
6B. 大于12000×g 离心10 min。
* 4℃条件下离心
7A. 弃滤液,离心管中加入700 μl Buffer RW1,悬浮沉淀,12,000×g离心5 min。
* 确认在Buffer RW1中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
8A. 弃滤液,离心管中加入700 μl Buffer RPE,悬浮沉淀12,000×g离心5 min。
* 确认在Buffer RPE中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
9A. 尽弃滤液,室温干燥去除乙醇。
10A.加入10-100 μl RNase-free Water,溶解沉淀,即得RNA
 
RNA定量及纯度检测
总RNA 的定量和定性分析: 所有标本均经紫外分光光度仪检测所提取总RNA 的浓度及纯度,ODA260/ODA280 的值为1.7~ 2.0。
 
 
 
 
 


 

EZ-RNA-B3
骨髓细胞总RNA小量提试剂盒

试剂盒内容
50
Cat:RN325
250
Cat: RN326
Miniprep column
50
50×5
2 ml microfuge tube
50
50×5
溶液RS  Solution RS
25 ml
25ml×5
溶液RR Buffer RR
25 ml
25 ml×5
溶液RW1 Buffer RW1
15 ml
15 ml×5
溶液RPE  Buffer RPE
15 ml
15 ml×5
RNase-free Water
10 ml
10 ml×3
说明书     Protocol
1
1

 
贮存条件:
室温,有效期2年。

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