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■ 产品内容
PC200
GA Pfu HS （1.25U/ul） 200ul
5×Pfu BufferⅠ (Mg2+plus) 1ml
5×Pfu BufferⅡ (Mg2+plus) 1ml
dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul
6×Loading Buffer 1ml
PC201
GA Pfu HS （1.25U/ul） 200ul×4
5×Pfu BufferⅠ (Mg2+plus) 1ml×4
5×Pfu BufferⅡ (Mg2+plus) 1ml×4
dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul×4
6×Loading Buffer 1ml×4
PC202
GA Pfu HS （1.25U/ul） 200ul×12
5×Pfu BufferⅠ (Mg2+plus) 1ml×12
5×Pfu BufferⅡ (Mg2+plus) 1ml×12
dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul×12
6×LoadingBuffer 1ml×6
PC200 (Buffer Mg2+free)
GA Pfu HS（1.25U/ul） 200ul
5×Pfu BufferⅠ (Mg2free) 1ml
5×Pfu BufferⅡ (Mg2+plus) 1ml
MgCl2(25Mm) 1ml
dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul
6×Loading Buffer
dNTP
浓度 各2.5mM 200ul
状态 水溶液(A钾盐，PH7.0～9.0)
纯度 各98%以上 |
■ 产品说明
GA Pfu HS是抗Pfu单克隆抗体和GA Pfu的混合制品，适用于Hot Start PCR。高温加热前，抗Pfu单克隆抗体与Pfu 酶结合，抑制聚合酶的活性，从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Pfu单克隆抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤已变性，因此无需特殊失活处理，在常规PCR反应条件下即可使用。Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平端。
■ 活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。
■ 纯度检验
SDS-PAGE检验纯度大于99% ；50 U的本酶和1.8 μg的pUCm-T质粒 DNA在74℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化，说明无核酸酶活性。
■ 产品性能
1．热稳定性检测: 94ºC时，每微升5单位Pfu DNA 聚合酶在缓冲液中的半衰期长于1时。
2．因含有酶稳定剂，反复多次冻融，对酶活性几无影响。
3．以λDNA为模板，可以很好地扩增8kbp的DNA片段。
4．长片断的扩增，与模板的结构和设计的引物有很大关系。如本品扩增长片段不理想, 请采用本公司的LATaq,EXTaq, LAPower DNA Polymerase。
■ 用途
1. Hot Start PCR法扩增DNA。
2. DNA序列测定。
■ 反应举例（50ｕl体系，供参考）
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5×PCR Buffer 10μl
dNTP Mixture（各2.5 mM） 8 μl
Template DNA（λDNA） 2.5 n g
Primer 1（10 μM） 1 μl
Primer 2（10 μM） 1 μl
GA Pfu HS（1. 25U/µl） 2 μl
ddH2O up to 50 μ l |
94℃ 3′
94℃ 30″
55℃ 30″ 30 Cycles
72℃ 1000b /60″
72℃ 5′
PCR取适量电泳检测结果 |
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