■ 产品内容
PC100
GA Taq (1.25U/ul) 200ul
10×PCR Buffer (Mg2+plus) 1ml
dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul
6×Loading Buffer 1ml
PC101
GA Taq (1.25U/ul) 200ul×4
10×PCR Buffer (Mg2+plus) 1ml×4
dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul×4
6×Loading Buffer 1ml×4
PC102
GA Taq (1.25U/ul) 200ul×12
10×PCR Buffer (Mg2+plus) 1ml×12
dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul×12
6×Loading Buffer 1ml×12
PC100(buffer Mg2+free)
GA Taq (1.25U/ul) 200ul
10×PCR Buffer (Mg2+free) 1ml
MgCl2(25Mm) 1ml
dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul
6×Loading Buffer
dNTP
浓度 各2.5mM 200ul
状态 水溶液(A钾盐,PH7.0~9.0)
纯度 各98%以上 |
■ 产品说明
本产品是经大肠杆菌重组的94 kDa耐热的DNA聚合酶。该酶具有5’→3’核酸外切酶的活性。该产品主要用于DNA的PCR扩增,DNA测序,可以很好地扩增保真度要求不高的2~6 kb的DNA片段。在72℃时,DNA的反应速度为1~2kb/分钟。PCR产物3’端为A,可以直接TA克隆。
■ 活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
■ 纯度检验
SDS-PAGE检验纯度大于99% ;50 U的本酶和1.8 μg的pUCm-T质粒 DNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化,说明无核酸酶活性。
■ 产品性能
1.热稳定性检测: 94ºC时,每微升5单位Taq DNA 聚合酶在缓冲液中的半衰期长于1时。
2.因含有酶稳定剂,反复多次冻融,对酶活性几无影响。
3.以λDNA为模板,可以很好地扩增8kbp的DNA片段。
4.长片断的扩增,与模板的结构和设计的引物有很大关系。如本品扩增长片段不理想,请采用本公司的LATaq,EXTaq, LAPower DNA Polymerase
■ 反应举例(50ul体系,供参考)
10×PCR Buffer 5 μl
dNTP Mixture(各2.5 mM) 8 μl
Template DNA(λDNA) 2.5 n g
Primer 1(10 μM) 1 μl
Primer 2(10 μM) 1 μl
Taq(2.5U/µl) 2 μl
ddH2O up to 50 μ l |
94℃ 3′
94℃ 30″
55℃ 30″ 30 Cycles
72℃ 1000b /60″
72℃ 5′
PCR取适量电泳检测结果 |
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